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技術(shù)文獻(xiàn)

DNA聚合酶的歷史簡介
閱讀次數(shù):932 發(fā)布時(shí)間:2022/11/29 10:38:27
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  在50年代的中期,A. Kornberg和他的同事們就想到DNA的復(fù)制必然是一種酶的催化作用,于是決心分離出這種酶并研究其結(jié)構(gòu)和作用機(jī)制。為了達(dá)到這個(gè)目的,他們分離的蛋白,然后加到體外合成系統(tǒng)中即 同位素標(biāo)記的dNTP、Mg2+及模板DNA,經(jīng)過大量的工作,于1956年終于發(fā)現(xiàn)了DNA聚合酶Ⅰ(DNA polymerase Ⅰ,DNA pol Ⅰ)原來稱為Kornberg酶。以后又相續(xù)發(fā)現(xiàn)了DNA pol Ⅱ和DNA pol Ⅲ。開始人們以為DNA pol I是細(xì)菌中 DNA復(fù)制主要的酶類,后來發(fā)現(xiàn)DNA pol Ⅰ的 突變株照樣可以復(fù)制,才清楚它并不是主角,F(xiàn)已知道在DNA復(fù)制中起主導(dǎo)作用的是DNA pol Ⅲ,至于pol Ⅱ的功能如還不十分清楚。DNA聚合酶的共同特點(diǎn)是:

⑴需要提供合成模板;⑵不能起始新的DNA鏈,必須要有 引物提供3'-OH;⑶合成的方向都是5'→3'⑷除聚合DNA外還有其它功能。

所有 原核和真核的DNA聚合酶都具有相同的合成活性,都可以在3'-OH上加核苷酸使鏈延伸,其速率為1000 Nt/min。加什么核苷酸是根據(jù)和 模板鏈上的堿基互補(bǔ)的原則而定的。

E.coli的DNA pol Ⅰ涉及 DNA損傷修復(fù),在 半保留復(fù)制中起輔助的作用。DNA pol Ⅱ在修復(fù)損傷中也是有重要的作用。DNA pol Ⅲ是一種多亞基的蛋白。在DNA新鏈的從頭合成(de novo)中起 復(fù)制酶的作用。

所有 原核和真核的DNA聚合酶都具有相同的合成活性,都可以在3'-OH上加核苷酸使鏈延伸,其速率為1000 Nt/min。加什么核苷酸是根據(jù)和 模板鏈上的堿基互補(bǔ)的原則而定的。

E.coli的DNA pol Ⅰ涉及 DNA損傷修復(fù),在 半保留復(fù)制中起輔助的作用。DNA pol Ⅱ在修復(fù)損傷中也是有重要的作用。DNA pol Ⅲ是一種多亞基的蛋白。在DNA新鏈的從頭合成(de novo)中起 復(fù)制酶的作用。

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