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微量分光光度計(jì)和普通分光光度計(jì)的區(qū)別
閱讀次數(shù):1028 發(fā)布時(shí)間:2022/12/6 9:58:16
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傳統(tǒng)分光光度計(jì):
1、樣品體積要求大,絕大部分要50μL以上
2、需使用比色皿
3、每次換樣品時(shí),比色杯需要清洗,工作繁重
4、光程一般為10mm,樣品需要稀釋?zhuān)瑴y(cè)量濃度范圍小
5、燈源一般由氘燈(紫外)和鎢燈(可見(jiàn))組成,壽命短
6、需要預(yù)熱半個(gè)小時(shí)以上
7、顯示吸光度值,不顯示濃度值
8、儀器體積大,質(zhì)量重

微量分光光度計(jì):
1:所需樣品體積小,僅需1~2μL
2:不需要比色皿,用移液槍直接將樣品滴加到檢測(cè)平臺(tái)上,測(cè)量時(shí)樣品會(huì)自動(dòng)形成液柱
3:只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測(cè)平臺(tái)上擦拭干凈即可
4:具有1mm和0.2mm兩個(gè)光程(由電磁閥調(diào)節(jié)),樣品無(wú)需稀釋?zhuān)瑴y(cè)量范圍可達(dá)到常規(guī)分光光度計(jì)的50倍
5:氙氣閃光燈為燈源,壽命長(zhǎng),性能穩(wěn)定
6:不需要預(yù)熱,可隨時(shí)檢測(cè)
7:顯示吸光度值的同時(shí),程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料)
8:體積小(21cm×17cm×11cm ),質(zhì)量輕(1.35kg)

常見(jiàn)分光光度計(jì)種類(lèi)及區(qū)別
分光光度計(jì)是一種分析測(cè)量光譜的儀器,因?yàn)閼?yīng)用需求的不同,分光光度計(jì)有著不同的種類(lèi)。分光光度計(jì)按照波長(zhǎng)及應(yīng)用域的不同可以分為:

(1)可見(jiàn)光分光光度計(jì)
(2)紫外分光光度計(jì)
(3)紅外分光光度計(jì)
(4)熒光分光光度計(jì)
(5)原子吸收分光光度計(jì)。

現(xiàn)生命科學(xué)域比較流行的超微量分光光度計(jì)是屬于紫外分光光度計(jì)的一種。

(1)可見(jiàn)分光光度計(jì)

用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光(400~760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器,稱(chēng)為可見(jiàn)分光光度計(jì)?稍600nm測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。

(2)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器?梢詼y(cè)定核酸和蛋白的濃度,也可以測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。紫外分光光度計(jì)又可分為單光束,假雙光束,雙光束。它們的用途又有區(qū)別。

a) 單光束:適于在給定波長(zhǎng)處測(cè)量吸光度或透光度,一般不能作全波段光譜掃描,要求光源和檢測(cè)器具有很高的穩(wěn)定性。
b) 雙光束:自動(dòng)記錄,快速全波段掃描?上庠床环(wěn)定、檢測(cè)器靈敏度變化等因素的影響,特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)雜,價(jià)格較高。
c) 假雙光束也就是比例雙光束,它的原理是由同一單色器發(fā)出的光被分成兩束,一束直接到達(dá)檢測(cè)器,另一束通過(guò)樣品后到達(dá)另一個(gè)檢測(cè)器。這種儀器的優(yōu)點(diǎn)是可以監(jiān)測(cè)光源變化帶來(lái)的誤差,但是并不能消除參比造成的影響。
 
(3)紅外分光光度計(jì)

一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜,這是研究有機(jī)化合物常用的光譜區(qū)域,能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣。

紅外光譜法的特點(diǎn)是:快速、樣品量少(幾微克-幾毫克),特征性強(qiáng)(各種物質(zhì)有其特定的紅外光譜圖)、能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣以及不破壞樣品。
 
(4)熒光分光光度計(jì)

熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。應(yīng)用于科研、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保以及臨床檢驗(yàn)、食品檢驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)等域。

通過(guò)對(duì)這些參數(shù)的測(cè)定, 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。
(5)原子吸收分光光度計(jì)
 
該法主要適用樣品中微量及痕量組分分析常規(guī)儀器。是材料分析及質(zhì)量控制部門(mén)進(jìn)行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。

以上幾種常見(jiàn)的分光光度計(jì)種類(lèi)區(qū)別便是本文為大家介紹的內(nèi)容,希望大家能夠在了解之后更好的運(yùn)用分光光度計(jì)。

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