1、金黃色/葡萄菌檢測第二法，從典型菌落中任選5個，是從一個平行樣中選5個還是5個平行樣加起來選5個？
答：從符合計數(shù)范圍的稀釋度三個平行樣中任選五個做血漿凝固酶試驗。
2、國標(biāo)GB4789.10-2016金黃色/葡萄球菌檢驗中培養(yǎng)時間很多都改成了24-48h ，這個跨度有點大，具體怎么判定啊？
答：如果培養(yǎng)24h后已經(jīng)長菌就不需要再進(jìn)行培養(yǎng)了；如果培養(yǎng)24h后未長菌則需要繼續(xù)培養(yǎng)至48h。
3、Baird-Parker培養(yǎng)基上，金黃色/葡萄球菌和普通變形桿菌都是黑色菌落，有渾濁帶和外透明帶，有的說普通變形桿菌的渾濁帶比較大，可是培養(yǎng)基上很難判斷，那有沒有更好的判斷方式？
答：金葡：直徑約為0.5～1μm。平板上菌落呈金黃色，也有時為白色，大而突起、圓形、不透明、表面光滑，周圍有溶血圈，而Baird－Parker平板上為圓形、光滑凸起、濕潤、直徑為2～3mm，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透明圈；在BP上區(qū)分不出來，需要進(jìn)一步生化實驗。
4、金黃色/葡萄球菌定性檢驗分離中，要求分別用BP平板跟血平板�？墒堑�5.5確認(rèn)鑒定里面，在血漿凝固酶試驗中，只需選其中一個就可以。
那么為什么不在分離這個步驟里就只使用BP平板呢。
答：一個看形態(tài)，一個看溶血，只有按照標(biāo)準(zhǔn)方法檢驗的結(jié)果才有法律效力。
5、金黃色/葡萄球菌第二法涂布法中，1ml接種到三塊平板是用一條玻璃涂布棒涂布就好還是同個樣品不同平板也要更換涂布棒涂布？
答：個人見解，一根就可以了，/后統(tǒng)計數(shù)量的時候，是計算三個板的總數(shù)。
6、Baird-Parker瓊脂配制中說要冷卻至50°C的意思是高壓滅菌完放入50°C的恒溫水浴鍋嗎？
答：高壓滅菌出鍋后就制作BP平板，可以將熱培養(yǎng)基基礎(chǔ)進(jìn)行冷卻，加入增菌劑時保/證基礎(chǔ)培養(yǎng)基的溫度不超過50攝氏度，不然可能影響增菌劑的效果。
7、每個稀釋度分別吸取1mL樣品勻液以0.3mL、0.3mL、0.4mL接種量分別加入三塊BP平板，以0.3mL、0.3mL、0.4mL接種量的作用是？如果同時在1ml的移液管中分別放入到三個平板中，當(dāng)剩下的0.4nl樣品液，存在的偏差是否對結(jié)果有影響？平板上是否應(yīng)該做好相對應(yīng)的標(biāo)識？
答：每板分?jǐn)偟囊毫浚阌谕坎几稍?; 三板共計1mL，用來計量。使用總則規(guī)定的經(jīng)檢校的吸量管，吸1mL分到三塊板上即可，先能夠按標(biāo)準(zhǔn)完成測定，量器誤差對不確定度的影響留待探討。不管測定啥項目，平板都要作清楚標(biāo)記。
8、無菌涂布棒是使用高壓濕熱滅菌還是可以按照接種環(huán)這樣進(jìn)行使用？
答:涂布捧，提干熱、濕熱滅菌，現(xiàn)場灼燒滅菌，均可。購買使用已經(jīng)滅菌的、一次性的涂布棒，也行。
9、如涂布過程中，觸及平板邊緣，出現(xiàn)的情況是菌落蔓延生長嗎？
答：觸及邊緣，順邊緣擴(kuò)散生長，無法像在平面上生長那樣便于觀察計數(shù)。
10、BP平板的傾倒量是否有規(guī)定，還是以15-20mL的量為好？且BP平板是當(dāng)天檢驗，當(dāng)天滅菌使用，不需進(jìn)行剔除試驗是嗎？
答：就是通常平板澆注的用量。B.P.平板的制作、貯存，詳見標(biāo)準(zhǔn)和培養(yǎng)基說明書。作好相關(guān)質(zhì)控。
11、如樣液未完/全吸收，就翻轉(zhuǎn)平板，是容易掉落下來，還是會影響金黃色/葡萄球菌的生長？
答：有液體存在，長出的菌落可能洇漫交疊不清晰，觀察計數(shù)困難。
12、分別做血漿凝固酶試驗，如可疑還是需要挑取到營養(yǎng)瓊脂小斜面進(jìn)行鑒定是嗎？
答：血凝酶試驗，按標(biāo)準(zhǔn)5.5.2步驟進(jìn)行。試驗開始時，就要同時接種到BHI和NA斜面。先用BHI培養(yǎng)物鑒定，再用NA斜面培養(yǎng)后再次轉(zhuǎn)接到BHI的培養(yǎng)物重復(fù)鑒定。
13、同時劃線接種到血平板，是接種到一個平板便可？
答：一板劃成幾個區(qū)，接種幾個菌落，能充分生長便于觀察就可以的。
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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