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技術(shù)文獻(xiàn)

表達(dá)β-半乳糖苷酶噬菌體的噬菌斑分析
閱讀次數(shù):1532 發(fā)布時間:2018/9/25 9:19:33
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材料:

LB或NZCYM頂層瓊脂或瓊脂糖,含有X-gal。對于3ml頂層瓊脂,加40µl 2%X-gal。X-gal要在臨用前才加入已冷卻的頂層瓊脂(47℃)中。
 

大腸桿菌鋪平板細(xì)菌。只有不是β-半乳糖苷酶的過量表達(dá)株,可采用任何支持特異性λ噬菌體裂解生長的大腸桿菌。細(xì)菌染色體上單拷貝lacZ基因的存在不影響噬菌斑的檢測。

 

方法:
1.  將λ噬菌體原種于SM+明膠液稀釋。
2.  用10µl適當(dāng)稀釋的λ噬菌體感染0.1ml鋪平板細(xì)菌。感染培養(yǎng)物37℃溫育20min。
3.  用3ml含X-gal的已熔頂層瓊脂(47℃)至個試管,通過輕拍或輕微渦旋振蕩混勻,隨后倒入至瓊脂平板上。
4.  用剩下的噬菌體原種的稀釋液重復(fù)步驟3。
5.  當(dāng)頂層瓊脂凝固后,將平板于37℃倒置培養(yǎng)15-18h。
6.  將平板哦成那個37℃培養(yǎng)箱中取出,再于室溫下放置2h,然后記錄噬菌斑的顏色。



生化試劑的種類與等級說明:
(1)免疫試劑包括抗體及抗血清、正常血清及補(bǔ)體、抗原、免疫組織化學(xué)研究用試劑、細(xì)胞培養(yǎng)用試劑、細(xì)胞分離試劑、凝膠內(nèi)擴(kuò)散法及電泳試劑等。
(2)基因工程用試劑包括基因表達(dá)與基因重組、人工合成蛋白、激素、核酸合成試劑、核酸制劑、內(nèi)切酶等。
(3)誘變劑和致癌物質(zhì)主要供測定工作場所與生活環(huán)境中的毒物質(zhì)的致癌性與化學(xué)毒物的致突變性。
(4)臨床診斷試劑主要供醫(yī)療系統(tǒng)中的臨床病理診斷、生化診斷、液晶診斷、同位素診斷與一般化學(xué)診斷等診斷檢查中所用的一大類化學(xué)試劑。
(5)工業(yè)用化學(xué)品包括試制開發(fā)的工業(yè)用化學(xué)品,有四千種以上,還在不斷增加。

 


管理竅門:
一般按用途可以分為通用試劑、高純試劑、分析試劑、儀器分析試劑、臨床診斷試劑、生化試劑、無機(jī)離子顯色劑試劑等。有四種常用規(guī)格:
1.優(yōu)級純或一級品(GR 精密分析和科學(xué)研究工作);
2.分析純或二級品(AR 重要分析和一般研究工作);
3.化學(xué)純或三級品(CP 工礦及學(xué)校一般化學(xué)實驗);
4.實驗試劑(L.P.)。
大多數(shù)的試劑具有一定的毒性及危險性。對科研試劑的加強(qiáng)管理,不僅是保證分析結(jié)果質(zhì)量的需要,也是確保人民生命財產(chǎn)安全的需要。試劑應(yīng)根據(jù)毒性、易燃性、腐蝕性和潮解性等不同的特點,以不同的方式妥善管理。
保存注意事項:低溫、避光、干燥陰涼處封閉貯存,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混放、混運。本品為非危險品,可按一般化學(xué)品運輸,輕搬動輕放,防止日曬、雨淋。
我們提供的試劑產(chǎn)品品質(zhì)優(yōu)良,都是通過嚴(yán)格的檢測體系認(rèn)證。
 

原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

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