當您選擇
抗體時，些有用的建議如下:
通過查閱文獻，查找使用過類似抗體的實驗室進行咨詢；
詢問其他實驗室成員是否已經(jīng)用過了適合您實驗的抗體；
檢查抗體的克隆性、應用適應性、宿主物種和種屬反應性等各種數(shù)據(jù)。
查看供應商提供的圖片和數(shù)據(jù)——數(shù)據(jù)是否可信、實驗結果優(yōu)劣鑒定？
參考引用該抗體的任何論文和論文中數(shù)據(jù)的表現(xiàn)選擇適合自己的抗體。
抗選擇
01 確認研究用途
研究主題是什么？
抗體的克隆性質(zhì)？
02 抗體的種屬？
樣本的種屬來源需要和抗體的種屬來源不同。像western blot這樣的實驗應用，樣本是沒有內(nèi)源性免疫球
蛋白(IgG)的細胞裂解液，或者使用直標抗的實驗應用，都不用擔心這個問題。
如果不得不需要使用和樣本種屬來源相同的抗體 (如鼠抗鼠的抗體)，建議進行抗體定制服務。
03 非模式生物
如果研究對象為非模式生物，并且不得不要用種在該物種中沒有被測試過的抗體。當然很可能無法得到理想的結果，但是大部分的保守序列蛋白質(zhì)是可以被個未經(jīng)驗證的抗體識別的。
因此，如果沒有很好地選擇，般建議選擇對目標生物的該蛋白進行序列比對，并且得出該蛋白序列是否足夠保守的結果。（Swiss-Prot蛋白數(shù)據(jù)庫鏈接中可以找到所需的序列，還有些網(wǎng)站提供計算相似度的工具，例如多序列比對工具CLUSTALW.）
將抗體的免疫原序列與您想檢測的物種的蛋白序列進行比對，如果重合比對結果重復度大于85%，那么兩者可能會發(fā)生交叉反應效應（即使是比對得分大于85%，也無法完全保證抗體定會識別）需要使用多個對照來確定該抗體是按您預期與靶標特異地結合。
關于二抗選取的幾個建議：
選擇蕞亮的熒光素來標記表達量蕞低的蛋白質(zhì)
當您使用多色標記時，所有二抗應該保持物種來源致
如果您在實驗用來自和二抗同宿主物種的血清來封閉樣本，這將顯著降低背景
預吸附二抗 對于多色分析很有用，可確保較低的物種間交叉反應性
片段抗體 更小且可高效得滲入組織（對IHC很有用）
生物素偶聯(lián)物可檢測低豐度蛋白
原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司
客服一
