技術(shù)文獻(xiàn)
單克隆抗體技術(shù)原理如下：
由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原表位的抗體，稱為單克隆抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來制備，雜交瘤（hybridoma）抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上，將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。用具備這種特性的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群，可制備針對(duì)一種抗原表位的特異性抗體即單克隆抗體。
單克隆抗體的制備過程
單克隆抗體的大量制備主要采用動(dòng)物體內(nèi)誘生法和體外培養(yǎng)法。
(1)體內(nèi)誘生法取BALB/c小鼠，先腹腔注射0.5ml液體石蠟或降植烷進(jìn)行預(yù)處理。1-2周后，腹腔內(nèi)接種雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞在小鼠腹腔內(nèi)增殖，并產(chǎn)生和分泌單克隆抗體。約1-2周，可見小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水，即可獲得大量單克隆抗體。
(2)體外培養(yǎng)法將雜交瘤細(xì)胞置于培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中，雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生并分泌單克隆抗體，收集培養(yǎng)上清液，離心去除細(xì)胞及其碎片，即可獲得所需要的單克隆抗體。但這種方法產(chǎn)生的抗體量有限。各種新型培養(yǎng)技術(shù)和裝置不斷出現(xiàn)，大大提高了抗體的生產(chǎn)量。
單克隆抗體技術(shù)可用于探討
①蛋白質(zhì)的精細(xì)結(jié)構(gòu)；
②淋巴細(xì)胞亞群的表面新抗原；
③組織相容性抗原；
④激素和藥物的放射免疫（或酶免疫）分析；
⑤腫瘤的定位和分類；
⑥純化微生物和寄生蟲抗原；
⑦免疫治療和與藥物結(jié)合的免疫-化學(xué)療法(“導(dǎo)彈”療法,利用單克隆抗體與靶細(xì)胞特異性結(jié)合，將藥物帶至病灶部位。因此，單克隆抗體可直接用于人類疾病的診斷、預(yù)防、治療以及免疫機(jī)制的研究，為人類惡性腫瘤的免疫診斷與免疫治療開辟了廣闊景。
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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