技術(shù)文獻(xiàn)
細(xì)胞樣本在流式細(xì)胞儀分選后,保存和處理方法如下:
保存方法:
短期保存(數(shù)小時(shí)至數(shù)天):
置于4℃冰箱:在含有適當(dāng)培養(yǎng)基和血清的條件下,可保存較短時(shí)間,但細(xì)胞活性可能會(huì)逐漸下降。
可添加細(xì)胞保護(hù)劑,如DMSO(二甲基亞砜),但需注意其濃度和對(duì)細(xì)胞的影響。
長(zhǎng)期保存(數(shù)周、數(shù)月甚至數(shù)年):
液氮凍存:將細(xì)胞懸浮在含有冷凍保護(hù)劑(如10%DMSO和90%胎牛血清)的培養(yǎng)基中,逐步降溫至-80℃,然后轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
處理方法:
繼續(xù)培養(yǎng):
如果細(xì)胞活性良好,可將分選后的細(xì)胞接種到新的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中,在合適的培養(yǎng)條件下繼續(xù)培養(yǎng)。
定期觀察細(xì)胞狀態(tài),監(jiān)測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖情況。
實(shí)驗(yàn)分析:
提取DNA、RNA或蛋白質(zhì)進(jìn)行分子生物學(xué)分析,如PCR、測(cè)序、Western blot等。
進(jìn)行細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn),如增殖實(shí)驗(yàn)、遷移實(shí)驗(yàn)、凋亡檢測(cè)等。
細(xì)胞固定:
若要進(jìn)行免疫熒光染色等形態(tài)學(xué)觀察,可以使用多聚甲醛等固定劑對(duì)細(xì)胞進(jìn)行固定。
在保存和處理分選后的細(xì)胞時(shí),要始終注意無(wú)菌操作,避免細(xì)胞污染,同時(shí)根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求和細(xì)胞特性選擇合適的方法。
原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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