多抗和單抗優(yōu)缺點(diǎn)比較
多克隆
抗體能識別任一抗原上的多個(gè)表位，而單克隆抗體僅檢測任一抗原上的一個(gè)表位。但是它們兩者有著屬于各自的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。
多克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)
多克隆抗體可有助于放大低表達(dá)水平的靶
蛋白信號，因?yàn)榘械鞍卓稍诙鄠�(gè)表位上結(jié)合不 止一個(gè)抗體分子。但是這會(huì)給定量實(shí)驗(yàn)造成不利影響，因?yàn)榻Y(jié)果將變得不準(zhǔn)確。
由于能識別多個(gè)表位，多克隆抗體可在 IP/ChIP 中得到更好的結(jié)果。比單克隆抗體更能容許抗原中的微小變化。
它們會(huì)識別出與免疫原蛋白質(zhì)具有高同源性的蛋白質(zhì)，或者從非免疫原物種的組織樣品中篩選靶蛋白，例如當(dāng)未測試物種中的抗原性質(zhì)未知時(shí)，有時(shí)會(huì)使用多克隆抗體。這也 使得檢測免疫原序列以確定是否有任何交叉反應(yīng)性非常重要。
多克隆抗體通常是檢測變性蛋白質(zhì)的/選。多表位通�？商峁└鼮橛辛Φ臋z測。多克隆抗體不適用于探測抗原的特定結(jié)構(gòu)域，因?yàn)榭寡逋ǔ？勺R別多個(gè)結(jié)構(gòu)域。
不足之處易于產(chǎn)生批次間差異。產(chǎn)生大量非特異性抗體，有時(shí)可能在某些應(yīng)用中產(chǎn)生背景信號。多表位使得檢測免疫原序列以確定是否有任何交叉反應(yīng)性非常重要。
客觀事實(shí)
識別任一抗原上的多個(gè)表位。獲得的血清將包含不同親和力抗體的異質(zhì)復(fù)合體混合物。多克隆抗體主要由 IgG 亞類組成。肽免疫原通常用于產(chǎn)生靶向唯1表位的多克隆抗體，特別適合高同源性的蛋白家族。
抗體制備
制備所需技術(shù)和技能不高。
制備時(shí)間短。
多克隆抗體不適用于探測抗原的特定結(jié)構(gòu)域，因?yàn)槎嗫寺】寡逋ǔ？勺R別多個(gè)結(jié)構(gòu)域。
單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)
雜交瘤制得后，就成為了恒定的再生源，所有批次都將相同–對確保實(shí)驗(yàn)步驟和結(jié)果的 一致性和標(biāo)準(zhǔn)化非常有幫助。單克隆抗體通常在切片和細(xì)胞染色造成的背景較低。因?yàn)樗鼈円愿鼜?qiáng)特異性檢測一個(gè)靶 表位，所以不太可能與其它蛋白質(zhì)發(fā)生交叉反應(yīng)。
由于具有特異性，單克隆抗體非常適于用作分析測定中的一抗，或者用于檢測組織中的 抗原，并且通常所產(chǎn)生的背景染色顯著低于多克隆抗體。
與多克隆抗體相比，單克隆抗體的同質(zhì)性非常高。如果實(shí)驗(yàn)條件保持不變，單克隆抗體 的各實(shí)驗(yàn)結(jié)果重現(xiàn)性很高。
單克隆抗體的特異性能使其在混合物中和抗原高/效地結(jié)合。
不足之處
可產(chǎn)生大量特異性抗體，但是可能特異性過強(qiáng)。
經(jīng)過抗原的化學(xué)處理后比多克隆抗體更易于丟失表位。這可通過使用同一抗原的兩個(gè)或多個(gè)單克隆抗體進(jìn)行補(bǔ)償。
客觀事實(shí)
僅檢測抗原上的一個(gè)表位。
它們僅由一個(gè)抗體亞型組成。在需要二抗進(jìn)行檢測時(shí)，應(yīng)針對正確的亞類選擇抗體。
抗體制備
需要高技術(shù)。
需要先培訓(xùn)才能使用技術(shù)。
制備雜交瘤耗時(shí)長。
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
客服一
