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    客戶通過(guò)阿儀網(wǎng)成功訂購(gòu)上海遠(yuǎn)慕小鼠水通道蛋白3（AQP-3）免疫組化試劑盒：

 

    產(chǎn)品名稱：小鼠水通道蛋白3（AQP-3）ELISA Kit

    英文名稱：Mouse Aquaporin 3,AQP-3 ELISA Kit

    產(chǎn)品分類：小鼠酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒[ELISA Kit for Mouse

    本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷！

    預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測(cè)定小鼠組織勻漿或其它相關(guān)生物液體中AQP-3含量。

    實(shí)驗(yàn)原理：

    用純化的AQP-3抗體包被微孔板，制成固相載體，往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的AQP-3抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后用底物（TMB）顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的AQP-3呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。

    操作步驟

    實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫，試劑不能直接在37 溶解；試劑或樣品配制時(shí)，均需充分混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

    1、 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液 100  ，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100 ，注意不要有氣泡，加樣 時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37 溫育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效

    性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

    2、 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100 （臨用前配制），酶標(biāo)板加上覆膜，37 溫育1小時(shí)。

    3、 棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400 /每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

    4、 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（臨用前配制）100 ，加上覆膜，37 溫育1小時(shí)。

    5、 棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。

    6、 每孔加底物溶液90 ，酶標(biāo)板加上覆膜37 避光顯色（反應(yīng)時(shí)間控制在15-30分鐘，當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔梯度不明顯時(shí)，即可終止）。

    7、 每孔加終止溶液50 ，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物    液的加入順序相同。

    8、 立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度（OD值）。

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